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PCR實驗室的原則與注意事項
發(fā)布時間： 2022-03-28 點擊次數(shù)： 1458次PCR實驗室是分子診斷的基礎(chǔ)，也是進行PCR實驗的場所。實驗室的基本知識仍然是非常重要的一環(huán)。博泰小編帶大家了解PCR實驗室的原則與注意事項有哪些。
一、PCR實驗室工作基本原則
1.進入各工作區(qū)域應(yīng)當嚴格按照單一方向進行。
試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→ 擴增產(chǎn)物分析區(qū)。
2.各工作區(qū)域必須有明確的標記，不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品不得混用。
3.不同的工作區(qū)域使用不同的工作服。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出。
4.實驗室的清潔應(yīng)當按試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行。不同的實驗區(qū)域應(yīng)當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。
5.工作結(jié)束后，必須立即對工作區(qū)進行清潔。工作區(qū)的實驗臺表面應(yīng)當可耐受諸如次氯酸鈉的化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應(yīng)當方便有效。
6.實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序，所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》。
二、Pcr實驗室的注意事項
1、試劑儲存和準備區(qū)
貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應(yīng)當直接運送至試劑貯存和準備區(qū)，不能經(jīng)過擴增檢測區(qū)，試劑盒中的陽性對照品及質(zhì)控品不應(yīng)當保存在該區(qū)，應(yīng)當保存在標本處理區(qū)。
2、標本制備區(qū)
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，可通過在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件，避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染，加入待測核酸后，必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對具有潛在傳染危險性的材料，必須在生物安全柜內(nèi)開蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。
3、擴增區(qū)
為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)當盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動。必須注意的是，所有經(jīng)過檢測的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開。
4、擴增產(chǎn)物分析區(qū)
核酸擴增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法、Southern轉(zhuǎn)移、核酸測序方法、質(zhì)譜分析等。
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